Gramfläck: hur den är gjord och vad den är till för
Innehåll
Gram-fläck, eller helt enkelt Gram, är en snabb och enkel teknik som syftar till att differentiera bakterier efter egenskaperna hos deras cellvägg efter exponering för olika färgämnen och lösningar.
Med hjälp av Gram-färgning är det således möjligt att förutom bakteriens form kontrollera färgen de får, och detta resultat är viktigt för att definiera andra strategier för att identifiera bakteriearten och för läkaren att indikera förebyggande behandling enligt de mikroskopiskt observerade egenskaperna.
Gramfärgning görs vanligtvis rutinmässigt i laboratoriet och är en del av bakterioskopiundersökningen. Förstå vad bakterioskopi är och hur det görs.
Hur Gram fläck görs
Gramfläck är en snabb, praktisk och billig metod för att identifiera bakterier som är ansvariga för infektioner, vilket är användbart för läkare för att indikera en förebyggande behandling för infektionen som kan förekomma, eftersom specifika egenskaper hos dessa grupper av bakterier är kända,
Gramfärgning görs i 7 huvudsteg, men protokollet kan variera beroende på laboratoriet:
- Placera några kolonier av bakterien på bilden, tillsätt en droppe vatten för att underlätta homogenisering av kolonierna;
- Låt det torka lite, och bladet kan passera snabbt genom lågan för att gynna torkning, men det är viktigt att vara uppmärksam på temperaturen, eftersom om temperaturen är för hög är det möjligt att det förändras strukturen på bakterier, som kan störa resultatet av undersökningen;
- När objektglaset är torrt, täck med det violetta kristallfärgämnet och låt det verka i cirka 1 minut.
- Tvätta bilden med en ström av rinnande vatten och täck bilden med lugol, som har som mål att fixa det blå färgämnet, och låt det fungera i 1 minut. Båda typerna av bakterier kan absorbera det komplex som bildas av färgämnet och lugolen och bli blå;
- Tvätta sedan bilden med rinnande vatten och applicera 95% alkohol och låt den verka i 30 sekunder. Alkohol är ansvarig för att lösa upp lipidmembranet som bildar gramnegativa bakterier och därmed ta bort komplexet som bildas mellan färgämnet och lugolen och missfärga dessa bakterier. I fallet med grampositiva bakterier uttorkar emellertid cellväggen hos grampositiva bakterier, vilket gör att porerna dras samman och gör dem ogenomträngliga;
- Tvätta sedan i rinnande vatten igen och täck bilden med det andra färgämnet, fuchsin eller safranin och låt det verka i 30 sekunder;
- Tvätta sedan bilden under rinnande vatten och låt den torka vid rumstemperatur.
Så snart objektglaset är torrt är det möjligt att lägga en droppe nedsänkningsolja och observera bilden under mikroskopet med ett 100x mål, vilket är möjligt att kontrollera förekomst eller frånvaro av bakterier, samt närvaron av jäst och epitel celler.
Vad är det för
Gramfärgning har som huvudmål att differentiera bakterier beroende på egenskaperna hos cellväggen och den allmänna morfologin. Enligt de egenskaper som observerats under mikroskopet kan bakterier klassificeras i:
- Grampositiva bakterier, som visualiseras med en blå färg på grund av det faktum att de inte missfärgas av alkohol, eftersom de har en tjockare cellvägg och deras porer tränger samman när de utsätts för lugol;
- Gramnegativa bakterier, som visualiseras med en rosa / lila färg på grund av att de missfärgas av alkohol och färgas av safranin eller fuchsin.
Efter att ha sett bakterierna under mikroskopet är det möjligt att ytterligare tester kommer att utföras i laboratoriet för att identifiera bakteriens art. Men genom Gram och samband med tecken och symtom som presenteras av personen kan läkaren indikera en förebyggande behandling tills resultatet av mer specifika undersökningar finns, eftersom det på detta sätt är möjligt att minska bakteriereplikationsgraden och förhindra komplikationer.